Vários métodos estão disponíveis para a detecção de Chlamydia trachomatis em amostras de material biológico: Exame direto (Giemsa), cultura de células (gold standard), imunofluorescência direta e métodos imunoenzimáticos . A detecção de anticorpos anti Chlamydia trachomatis, teste este limitado a casos especiais(1) , é realizado através de testes de imunofluorescência indireta e/ou ELISA.

O método de pesquisa direta de C.t. por PCR, LCR ou Captura híbrida, vem substituindo todas as técnicas anteriores com inúmeras vantagens.

EXAME DIRETO

A coleta é feita com swab ou com alça de platina, da uretra anterior ou do cérvix. A pesquisa pelo método de Giemsa, embora adequado para infecções oculares, não é recomendado para infecção do trato genital.

CULTURA DE CÉLULAS McCOY

Desde há muitos anos, a cultura de Chlamydia trachomatis em células McCoy têm sido considerada o teste padrão ouro para o diagnóstico da infecção por Chlamydia trachomatis.

Apesar de sua alta especificidade, a cultura apresenta algumas restrições: o tempo para obtenção do resultado e o fato de detectar apenas bactérias vivas, inviabilizando o teste na rotina. O resultado pode ser prejudicado por situações inadequadas de coleta, armazenamento e/ou transporte, o que diminui drásticamente a sua sensibilidade.

O método é trabalhoso e requer tempo, estrutura específica e profissionais treinados, mas continua sendo o “gold standard” para o diagnóstico das infecções por C. trachomatis.

IMUNOFLUORESCÊNCIA DIRETA

Técnica utilizada para a detecção de Chlamydia trachomatis com anticorpos monoclonais específicos (mais de 10 antígenos de C. trachomatis conhecidos são detectados) detecta corpos elementares em esfregaços uretrais e/ou endocervicais. Essa técnica apresenta sensibilidade de 85% a 98% de especificidade quando comparado com a cultura. O teste detecta unicamente a proteína de membrana e não distingue entre organismos vivos e mortos.

IMUNOFLUORESCÊNCIA INDIRETA

Técnica para pesquisa anticorpos anti Chlamydia trachomatis no soro. Esta técnica utiliza corpos elementares purificados como substrato. Um resultado com título (IgG) > 1:64 é considerado presuntivo da evidência de infecção. Título (IgG) < 1:64 sugere que o paciente não está em curso de uma infecção(1).

ELISA

Os métodos imunoenzimáticos para a pesquisa de anticorpos séricos, respectivamente, das classes IgG, IgA e IgM, são menos sensíveis e menos específicos do que os métodos citados e tem sua aplicação limitada a patologias como: prostatites crônicas , epididimites , infecções intra pélvicas (DIP - doença inflamatória pélvica) e infertilidade(2). Os testes imunológicos (pesquisa de anticorpos) não devem ser aplicados quando há suspeita de uretrites e cervicites. Nestes casos, o ideal é a pesquisa do antígeno por PCR na urina.

PCR , LCR

A reação em cadeia da polimerase (PCR) ou ligase (LCR), são métodos de especificidade e sensibilidade altas (100% e 97%, respectivamente), que utiliza a amplificação do ácido nucléico da Chlamydia (DNA-alvo), permitindo sua detecção, mesmo em concentrações pequenas, da ordem de 1 a 10 microrganismos por mililitro de material biológico.

O uso da PCR na detecção da Chlamydia trachomatis, auxilia no diagnóstico com grandes vantagens quando comparada aos métodos tradicionais.

A PCR , LCR e as técnicas de captura híbrida são os métodos de escolha para o diagnóstico da infecção por C. trachomatis. Podem ser realizadas em amostras endocervicais, uretrais e também em amostras de urina (primeiro jato), que pela facilidade tem sido o material amplamente usado para esta pesquisa.

Rotina: terças e quintas feiras
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Bibliografia

1. Scieux C, Colimon R, Bianchi A, Felten A, Perol Y. [Diagnostic value of the study of anti-Chlamidia antibodies in salpingitis. 379 cases] Presse Med 25;16(15):715-8,1987.

2. Land JA, Evers JL. Chlamydia infection and subfertility. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol 16(6):901-12,2002.